Ген KRAS кодирует небольшую ГТФазу, которая играет ключевую роль в передаче сигналов от рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) к нижестоящим эффекторам. Мутации KRAS обычно обнаруживаются в нескольких типах злокачественных опухолей человека, таких как метастатический колоректальный рак, аденокарцинома легкого и рак щитовидной железы. Наиболее распространенные мутации обнаружены в кодонах 12, 13 и 61. Несколько исследований показали, что опухоли, несущие любую из этих мутантных форм гена KRAS, с меньшей вероятностью отвечают на терапию антителами против EGFR. Американское общество клинической онкологии (ASCO) недавно опубликовало свое первое предварительное клиническое заключение (PCO), в котором предлагалось провести скрининг мутаций KRAS для всех пациентов, которым должна проводиться терапия моноклональными антителами против EGFR (например, цетуксимаб, панитумумаб и эрлотниб). Недавние исследования также показали, что не все пациенты с метастатическим колоректальным раком с опухолями KRAS дикого типа реагируют на терапию против EGFR. Это говорит о том, что дополнительные механизмы и/или пути могут быть вовлечены в механизм устойчивости к этим лекарственным средствам.
Мутации в BRAF, другом нижестоящем эффекторе EGF-активированного пути, были обнаружены в до 8% метастатических колоректальных опухолей. Исследования пациентов с метастатическим колоректальным раком показали устойчивость к анти-EGFR терапии у пациентов с опухолями, экспрессирующими мутированный BRAF. Эти данные убедительно свидетельствуют о том, что скрининг мутаций как KRAS, так и BRAF необходим для более точной идентификации опухолевых клеток, которые не будут реагировать на препараты против EGFR.
Набор для детекции мутаций KRAS и BRAF от EntroGen - это анализ на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР), в котором используются аллель-специфические праймеры для выявления присутствия мутаций, перечисленных в разделе характеристики. Для увеличения количества анализируемых мутаций KRAS используйте набор расширения панелей для детекции мутаций KRAS и NRAS (арт RASX-RT50)
Процедура тестирования включает в себя три простых шага:
- Выделение ДНК из биоптатов опухолей, образцах ткани, фиксированных в формалине и заключенных в парафиновые блоки (FFPE), свежезамороженных тканей или опухолевых клеточных линий
- Амплификация областей гена KRAS с использованием аллель-специфических зондов.
- Обнаружение продукта амплификации на приборе для ПЦР в реальном времени.